Научные статьи

  • "Иммунологические маркеры хронического гепатита." 2010 г. Узикова А.А., Васильева И.В., Воробьева Л.В., Колчева О.Р., Коноплева Г.Н., Малиновская О.А., Соколова М.Н., Халилова Р.Р., Хапман М.Э.,Чавга М.С., Шамшина Н.М., Арямкина О.Л.

    Материалы российской научно-практической конференции с международным участием.

    Ульяновск, 15-16 декабря 2010г. http://www.uni.ulsu.ru/Konferences/vso.php

    ИММУНОГЕНЕТИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ
    ХРОНИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА

    Узикова А.А., Васильева И.В., Воробьева Л.В., Колчева О.Р., Коноплева Г.Н., Малиновская О.А., Соколова М.Н., Халилова Р.Р., Хапман М.Э.,
    Чавга М.С., Шамшина Н.М., Арямкина О.Л.
    Ульяновский государственный университет,
    Ульяновская областная станция переливания крови,
    Россия, Ульяновск

    Определенные HLA-антигены ассоциируются с некоторыми патологическими процессами, а обладание тем или иным аллелем гена связывают со степенью риска развития заболеваний [1, 2, 3]. Работами исследователей показано, что хронический активный гепатит ассоциируется с HLA-B8 и HLA-DR3: HLA-B8 в 40% выявляется при хроническом гепатите и в 16% среди здоровых лиц. Наличие HLA-B8, В18, В35, В40 являлись прогностически значимым фактором развития ХАГ, из них В18 и В35 этиологически обусловленного HBV. При HLA-B8 чаще формировались аутоиммунные и алкогольные гепатиты. При циррозе печени чаще встречались АГ HLA A19, B18, B35. При HLA-B41, В7 регистрировалась минимальная гистологическая активность хронического гепатита С, при HLA-А28, В5, В13, В17 - умеренная активность ХГС, при HLA-А3, А11, В7, В5 – фиброз I степени, при HLA-А28, В13 – фиброз II степени. [4, 5, 6, 7, 8]. Другими исследованиями показано, что хронический гепатит В ассоциировался с АГ HLA-B18, В22, Cw6, DR3, хронический гепатит С характеризовался повышенной частотой распределения АГ HLA-B8, B35, Cw4 [9, 10, 11, 12]. При наличии анти-HCV чаще регистрировались фенотипические сочетания В8-В16, В16-В17 и гаплотипические – А1-В35, А3-В17, А9-В8 [13]. Выявлены факты генетической детерминированности биохимических процессов, маркируемых тканевыми АГ – получена связь носительства HLA-B8 и B35 с уровнями АЛТ, билирубина, тимоловой, сулемовой проб, СДГ, протромбина и риском развития вирусного гепатита [3].

    Цель исследования. Изучить распределение антигенов, гаплотипов и фенотипов I класса ГКГ системы HLA локусов А, В и С у больных хроническим гепатитом различной этиологии с целью выявления маркеров хронизации и определения маркеров иммунорезистентности при нем.

    Материалы и методы. За 1998-2004 гг. обследованы 632 больных хроническим гепатитом, который диагностирован впервые и 1381 здоровых доноров крови региона. Хронический гепатит (ХГ) диагностировали по стандартным критериям. Спектры маркеров HBV- и HCV-инфекции верифицировали методом ИФА с использованием реактивов НПО Нижний Новгород.

    Для изучения предикторов хронизации моно- и микствирусной HBV- HCV-инфекции, а также иммунопротекторов при них определяли антигены (АГ) I класса ГКГ системы HLA локусов HLA A, HLA B, HLA C а также их сочетания. Определение АГ локусов А, В и С I класса системы HLA проводилось при помощи микролимфоцитотоксического теста с окрашиванием эозином и оценкой результатов под микроскопами Биолам П-I и Биолам-МБИ-I. Использовали HLA-типирующие сыворотки НИИ гематологии и переливания крови МЗ РФ (Санкт-Петербург).

    Фактический материал обработан при помощи статистического пакета STATISTICA 6.0 и SPSS 13.0. В связи с разнородными группами наблюдений и сопоставлением параметров с различными выборками применены преимущественно непараметрические методы статистической обработки. По стандартной методике для выявления иммуногенетических маркеров рассчитывали показатель отношения шансов (ОШ). Фактический цифровой материал представлен в данных M±m. Различия оценивали как достоверные с уровнем 95% (р<0,05) и 99% (р<0,001) значимости. Определяли также и 95% доверительный интервал (95% ДИ).

    Результаты. Больные хроническим гепатитом подразделен по этиологическому принципу на неалкогольный стеатогепатит (n 289), хронический гепатит В (n 158), С (n 177) и В+С (n 8). Больные неалкогольным стеатогепатитом и здоровые доноры составили группу сравнения и группу контроля соответственно.

    Наиболее значимые различия в распределении антигенов HLA локусов HLA-A, HLA-B и HLA-C отражено в таблице 1. Установлены способствующие и протективные иммуногенетические факторы или иммуногенетические маркеры и иммунопротекторы хронизации вирусного гепатита В и С.

    Таблица 1.

    Антигены локусов А, В и Cw системы HLA в различных группах (в %)

    Антигены локусов А, В и Cw системы HLA в различных группах (в %)

    р1 сравнение доноров с НАСГ, р2 – с ХГВ, р3- с ХГС, р4-с ХГВ+С; * - 95% различия, ** - 99% различия.

    Анализ распределения АГ I класса ГКГ системы HLA локусов А, В и С, представленный в таблице 1 показал, что в сравнении со здоровым населением региона в 5-10-16 раз реже у больных неалкогольным стеатогепатитом (НАСГ) встречаются АГ В15 (р1<0,001) и Cw3 (р1<0,001), у больных хроническим гепатитом С (ХГ С) – Cw4 (р3<0,001) и Cw6 (р3<0,001). Данные маркеры отнесены к протективным факторам хронизации HCV-инфекции и собственно хронического гепатита. Вероятность прогрессирования заболевания при их наличии с 99% вероятностью снижена.

    Значительно чаще, чем у здоровых доноров при НАСГ и ХГ В встречается АГ А11 (р1<0,001, р2<0,001), у больных ХГ В еще и В6 (р2<0,001), у больных ХГ С – А32 (р3<0,001) и Cw2 (р3<0,001), ХГ В+С – Cw3 (р4<0,05).

    Иммуногенетическими маркерами хронизации HВV-инфекции с формированием ХГ В диагностированы HLA-А11 и HLA-В6, хронизации HCV-инфекции с формированием ХГС диагностированы АГ HLA-А32 и HLA-Cw2, а иммунопротекторами ХГС - HLA-Cw4 и HLA-Cw6.

    Распределение гаплотипов представлено в таблице 2, из данных которой видно, что в 4-9 и более раз реже по сравнению со здоровыми донорами встречаются: при НАСГ А10-В14 (р1<0,001) и А28-В7 (р1<0,001); при ХГ В – А3-В18 (р2<0,001), А10-В27 (р2<0,001), А11-В18 (р2<0,001), А11-В51 (р2<0,001), А28-В27 (р2<0,001) и Cw4-B18 (р2<0,001); при ХГ С - А11-В35 (р3<0,001), А28-В27 (р3<0,001) и Cw3-A2 (р3<0,001).

    Таблица 2.

    Маркеры иммунорезистентности для

    хронического гепатита различной этиологии (в %)

    Таблица 2

    р1 сравнение доноров с НАСГ, р2 – с ХГВ, р3- с ХГС, р4-с ХГВ+С; * - 95% различия, ** - 99% различия.

    Выше перечисленные маркеры с 99% вероятностью относятся к предикторам иммунорезистентности. А вот факторов иммунорезистентности при ХГ В+С – при микстинфицировании HBV+HCV не выявлено.

    В 4-5 и более раз чаще, чем у здоровых доноров (табл. 3) при НАСГ встречаются гаплотипы HLA А3-В14 и Cw2-B41, при ХГ В - А3-В44, А28-В8, Cw4-A32 и Cw6-A11, при ХГ С - А3-В41, Cw4-A32, Cw6-A9, Cw6-A10, Cw6-B8 и Cw6-B40, а при ХГ В+С - А2-А28, А1-В5, А3-В40, А3-В41, А9-В51, А9-В60, А28-В18, Cw3-B8, Cw4-B5, Cw4-B8, Cw6-A10 и Cw6-B16.

    Таблица 3.

    Прогностически неблагоприятные иммуногенетические факторы при хроническом гепатите различной этиологии (в %)

    Прогностически неблагоприятные иммуногенетические факторы при хроническом гепатите различной этиологии (в %)

    р1 сравнение доноров с НАСГ, р2 – с ХГВ, р3- с ХГС, р4-с ХГВ+С; * - 95% различия, ** - 99% различия.

    Данные маркеры с 99% вероятностью относятся к иммуногенетическим факторам прогрессирования. При НАСГ ими выступили гаплотипы HLA А3-В14 (ОШ = 6,42±0,26; 95% ДИ 3,86-10,7) и Cw2-B41 (ОШ = 4,0±0,45; 95% ДИ 1,64-9,76), при ХГ В - А3-В44 (ОШ = 6,77±0,55; 95% ДИ 2,32-19,8), А28-В8 (ОШ = 4,74±0,28; 95% ДИ 2,73-8,21), Cw4-A32 (ОШ = 4,5±0,51; 95% ДИ 1,66-12,1) и Cw6-A11 (ОШ = 4,67±0,26; 95% ДИ 2,79-7,83), при ХГ С - А3-В41 (ОШ = 5,13±0,49; 95% ДИ 1,96-13,4), Cw6-A9 (ОШ = 8,0±0,17; 95% ДИ 5,7-11,2), Cw6-A10 (ОШ = 18,4±0,19; 95% ДИ 12,6-26,9), Cw6-B8 (ОШ = 8,69±0,17; 95% ДИ 6,17-12,2) и Cw6-B40 (ОШ = 8,0±0,17; 95% ДИ 5,7-11,2), а при ХГ В+С - А2-А28 (ОШ = 9,63±0,74; 95% ДИ 2,26-41,1), А1-В5 (ОШ = 17,4±0,72; 95% ДИ 4,27-71,1), А3-В40 (ОШ = 7,74±0,83; 95% ДИ 1,53-39,3), А3-В41 (ОШ = 41,5±0,87; 95% ДИ 7,52-229,1), А9-В51 (ОШ = 98,5±1,28; 95% ДИ 7,97-1218), А9-В60 (ОШ = 5,89±0,83; 95% ДИ 1,17-29,7), А28-В18 (ОШ = 229,2±0,82; 95% ДИ 46,2-1138), Cw3-B8 (ОШ = 9,26±0,74; 95% ДИ 2,17-39,5), Cw4-B5 (ОШ = 16,3±0,81; 95% ДИ 13,9-58,1), Cw4-B8 (ОШ = 76,4±0,91; 95% ДИ 12,7-458,2), Cw6-A10 (ОШ = 17,7±0,72; 95% ДИ 4,33-72,1) и Cw6-B16 (ОШ = 171,6±0,79; 95% ДИ 36,4-810).

    Заключение. В результате проведенной работы выявлены иммуногенетические предикторы течения хронического гепатита.

    Иммуногенетическими маркерами неблагоприятного прогшнза неалкогольного стеатогепатита являются гаплотипы HLA А3-В14 и Cw2-B41.

    Иммуногенетическими маркерами хронизации HВV-инфекции с формированием ХГ В диагностированы АГ HLA-А11 и HLA-В6, гаплотипы А3-В44, А28-В8, Cw4-A32 и Cw6-A11.

    К иммуногенетическим маркерам хронизации HСV-инфекции с формированием ХГ С относятся АГ HLA-А32 и HLA-Cw2, а также гаплотипы А3-В41, Cw6-A9, Cw6-A10, Cw6-B8 и Cw6-B40.

    Прогностически неблагоприятным маркером при микстинфицировании HBV+HCV является обладание АГ HLA-Cw3, а также наличие гаплотипов А2-А28, А1-В5, А3-В40, А3-В41, А9-В51, А9-В60, А28-В18, Cw3-B8, Cw4-B5, Cw4-B8, Cw6-A10 и Cw6-B16.

    Иммунопротекторами развития неалкогольного стеатогепатита являются HLA-В15 и HLA- Cw3, гаплотипы А10-В14 и А28-В7. Маркерами иммунорезистентности хронизации HBV- и HCV-инфекции, или иммунопротекторами получены АГ и гаплотипы – для хронического гепатита В - А3-В18, А10-В27, А11-В18, А11-В51, А28-В27 и Cw4-B18, для хронического гепатита С - АГ HLA-Cw4 и HLA-Cw6, гаплотипы HLA А11-В35, А28-В27 и Cw3-A2. Маркеров – иммунопротекторов хронического микствирусного гепатита В+С не вявлено.

    Литература:

    1. Земсков А.М., Земсков В.М., Сергеев Ю.В., Вороновский В.А., Караулов А.В. 1000 формул клинической иммунологии, Москва, «Медицина для всех».- 2003.- 332 с.
    2. Змушко Е.И., Белозеров Е.С., Митин Ю.А. Клиническая иммунология. Санкт-Петербург.: Питер. - 2001. - 567 с.
    3. Караулов А.В. Клиническая иммунология и аллергология. Москва, «Медицинское информационное агентство», 2002.- 650 с.
    4. Левитан В.Н. и др. Антигены системы HLA как прогностические маркеры при хронических гепатитах /Левитан В.Н., Колчинв В.П., Попов Е.А., Дедов А.В. //Новые направления в гепатологии: Тез. докладов Фальк-симпозиума № 92. - Санкт-Петербург, 1996. - С. 219.
    5. Левитан Б.Н. Диагностическое и прогностическое значение антигеноа HLA при оценке течения хронических диффузных заболеваний печени. Гр. 01960012656.- Сб реф. НИР и ОКР.- 1999.- № 7.- С. 21.
    6. Попов Е.А., Левитан Б.Н., Мооочалова Н.Н. Связь антигенов HLA со снижением активности С2 компонента системы комплемента при циррозах печени вирусной этиологии //Российск. Журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии 2002, № 5.- т. XII.- Приложение 17. – С. 92: Матер. Восьмой Росс. Гастроэнтерологической недели 18-21 ноября 2002.- № 341.
    7. Соринсон С.Н. Вирусные гепатиты в клинической практике. - Санкт-Петербург. ТЕЗА, 1996.- 306 с.
    8. Чечеткин А.В., Касьянов А.Д., Юркаев И.М., Гусев Д.А., Козлюк П.А. Патоморфологические изменения в печени при хронической HCV-инфекции в зависимости от фенотипа HLA //Проблема инфекции в клинической медицине. Материалы научной конференции и VIII съезда Итало-Российского общества по инфекционным болезням. - Санкт-Петербург, 5-6 декабря 2002. - С. 410.
    9. Бондаренко А.Л. Клинико-иммунологические аспекты вирусного гепатита А и В у подростков //Автореф. Дис. ... д-ра мед. наук. – Санкт-Петербург. - 1995. - 43 с.
    10. Бондаренко А.Л. Роль HLA-фенотипа в формировании различных исходов гепатита В // Тезисы докл. II-ой Росс. научно-практ. конф. «Гепатит В, С, D и G - проблемы изучения, диагностики, лечения и профилактики”. Москва 14-16 октября 1997 г. – С. 26-27.
    11. Бондаренко А.Л. Роль иммунореактивности в формировании затяжного течения вирусного гепатита В // Эпидемиология и инфекционные болезни.- 1998.- № 3.- С. 42-46.
    12. Бондаренко А.Л., Брамзина С.В., Тиунова З.С. Особенности распределения антигенов гистосовместимости и показателей клеточного иммунитета у больных хроническим гепатитом // Тезисы докл. III-ей Росс. научно-практ. конф. «Гепатит В, С, D и G - проблемы изучения, диагностики, лечения и профилактики”, Москва 22-24 июня 1999 г. - С. 28.
    13. Кузнецов Н.И., Зайцева Г.А. Характеристика HLA-фенотипа у носителей антител к вирусу гепатита С // Тезисы докл. II-ой Росс. научно-практ. конф. «Гепатит В, С, D и G - проблемы изучения, диагностики, лечения и профилактики”. Москва, 14-16 октября.- 1997 г.- С.118-119.

    /

Возврат к списку